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　　酶标仪（MicroplateReader）是对酶联免疫检测（EIA）试验结果实行读取和解析的专业仪器。酶联免疫反响通过偶联正在抗原或抗体上的酶催化显色底物实行的，反响结果以色彩显示，通过显色的深浅即吸光度值的巨细就可能剖断标本中待测抗体或抗原的浓度。

　　酶标仪广大地操纵正在临床检查、生物学切磋、农业科学、食物和情况科学中，万分正在近几年中，因为多量的酶联免疫检测试剂盒的操纵，使得酶标仪正在生殖保健范畴中操纵越来越广大，同时推动了生殖矫健工夫程度抬高。

　　目前国内很多计生站体系发展了酶免检测项目，如：乙肝五项、爱滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。过去多半采用目测格式，报出的结果缺乏科学的依照。比如：某弓形虫检测试剂盒中，临界值轨则为：阴性比较品的OD值×2.5,通过目测无法剖断标本孔的反响色彩是否凌驾临界值。肉眼实行两孔之间的色彩比拟或者还行，但比拟一孔的色彩是否凌驾另一孔色彩的2.5倍就不或者。

　　国内多家巨子机构，如卫生部临床检查中央和方案生育体系等多次夸大酶标仪的紧急性，并恳求酶联免疫检测试剂应利用酶标仪判读，酶免试剂的质控也应利用酶标仪，并供给酶标仪测定的原始数据，而各厂家的试剂盒仿单没有是让用目测的。同时酶免检测的项目往往是极少本色性的影响和病变（如：肝炎、爱滋病、优生优育等），判读更恳求苛谨，由误诊惹起的纠葛很难解决。别的，住院手术病人术前的丙肝、爱滋等EIA试剂检测是避免因输血惹起影响激励的医疗事项纠葛的须要机谋，正慢慢被很多单元所采用。

　　行动微孔板比色计的酶标仪，其根本功效不过乎一个比色测定，所分歧的是正在测定波长限造、吸光度限造、光学体系、检测速率、震板功效、温度驾御、定性和定量测定软件功效等方面的分歧，当然全主动酶免疫解析体系还拥有主动洗板、温育、加样等功效。正在临床试验室实质办事中，试验职员正在利用酶标仪实行测定操作时，有时不免会对酶标仪的极少功能目标发作迷茫，以至对酶标仪的操纵发作舛讹的解析。如诸如利用酶标仪较用肉眼阅览测定的阳性率分明添加如许的题目。

　　大凡酶标仪的测定波长正在400~750nm或800nm之间，齐备可能满意ELISA的显色测定。目前国内常见的ELISA试剂盒所利用的标志用酶均为辣根过氧化物酶（HRP），底物平日为四甲基联苯胺（TMB）和邻苯二胺（OPD），其正在过氧化氢溶液的存不才，经HRP用意，区别氧化为2,2,-二氨基偶氮苯（DAB）和联苯醌。当pH值为5.0控造时，DAB正在450nm波利益有最大吸取，当pH值降为L 0时，最大吸取波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大，显色加深，于是常用强酸如硫酸或盐酸终止反响。TMB的氧化产品联苯醌正在波长450nm处有最大消光系数，即使HRP量少，H:O:和TMB过量时，则造成蓝色的阳离子根。消重pH,即可使蓝色的阳离子根蜕化为黄色的联苯醌，利用硫酸行动终止剂可使产品巩固90min.以是，450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。各样酶标仪都配有安放滤光片的可主动转换的部件，可能同时装置6~8片滤光片，所装备的滤光片均应包含上述两个波长，有的酶标仪以490nm滤光片取代492nm滤光片，影响不大。除了这两个根本滤光片表，推敲到双波长比色的必要，还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片，其他滤光片可依照己方的必要选取。有时，有的试验室指望用酶标仪作微量生化测定，故酶标仪分娩厂家对其分娩的酶标仪扩展了紫表检测功效，此时必要一个340nm波长滤光片。此时，酶标仪的测定波长限造就成为340-750nm或800nm。

　　酶标仪有单波长和双波长检测功效有时利用者不知正在什么情形下利用单或双波长检测。所谓的“单波长”便是利用一种对显色具最大吸取的波长即450 nm或492 nm实行比色测定；而“双波长”则除了用对显色具最大吸取的波长即450 nm或492 nm实行比色测定表，同时用对特异显色不敏锐的波长如630 nm实行测定，酶标仪结尾打印出来的吸光度则为二者之差。630 nm波长下获得的吸光度诟谇特异的，来自于板子上诸如指纹、尘土、脏物等所致的吸取。以是，正在ELISA比色测定中，最好利用双波长，且不必设空缺孔。

　　平日，酶标仪的吸光度测定限造正在。0-2.5之间即可能满意ELISA的测定恳求。早期的酶标仪可测定的吸光度大凡正在0-2.5之间，但现正在根本上都做了拓宽，可到达3.5以上，而且能依旧很好的严谨度与线性。如上海游目仪器公司MB-96C的吸光度测定限造（Abs）0-4.0，正在0-4.0限造，以是对付酶标仪的吸光度限造不必去有劲寻觅大的吸光度限造，闭键要看正在必定的吸光度限造内的线性和严谨度何如。

　　酶标仪的光学体系采用的是笔直光途多通道（平日为8或12通道，亦有单通道）检测，大凡为硅光管或光导纤维，除测定通道表，有的酶标仪尚有一个参比通道，每次测定可实行自我校准。酶标仪的光学体系功效何如，均可通过酶标仪测定的吸光度限造、线性度、严谨度和无误度等再现出来。光学体系好的话，则上述目标也应较佳。测定的严谨度与测定通道之间的均一性有直接相闭。单通道可避免因通道分歧所致的分歧。

　　酶标仪的检测速率是指其已毕比色测定所必要的时刻。检测速率速，有利于抬高检测的严谨度，即避免因为测定流程中，因测依时刻分歧所致的各微孔间吸光度间的分歧。目前市集上常见的酶标仪检测速率都特殊速，平日正在数秒钟内，如上海游目仪器公司MB-96B和MB-96C检测96孔只需单波长≤3秒/96孔，双波长≤6秒/96孔。

　　酶标仪的震板功效是指酶标仪正在对ELISA板孔实行比色测定前对其实行振荡混匀，使板孔内色彩均一。目前市集上常见的酶标仪均有震板功效，如上海游目仪器的MB-96C振板功效速率和时刻可调。利用有震板功效的酶标仪，正在实行ELISA测定显色反响已毕插足终止剂后，可不必振荡混匀，直接放人酶标仪上测定即可。

　　温育功效是指酶标仪自己能按恳求主动准确地驾御仪器内部的温度，使得ELISA测定中微孔板条的温育流程可正在仪器内部已毕，而无需再表配温箱。如上海游目仪器公司的MB-96B和MB-96等型号都拥有恒温孵育功效。温育功效只是酶标仪的一个附加功效，是否拥有并不行证明酶标仪层次的坎坷及仪器的优劣。行动试验室是否选取，则可依照己方试验室的条目及必要来决断。

　　软件功效是指酶标仪所拥有的对ELISA定性和定量测定及其他测定式样如酶标动力学、紫表和固结等数据的统计解析并呈报结果的功效。软件功效是中高等酶标仪的一个特殊紧急的功效。即使硬件方面区别不大，则软件就成为决断酶标仪优劣的惟一目标。对付用户来说，好的软件功效，对实质办事会有较大的帮帮。ELISA定性测定，酶标仪如拥有阳性剖断值（cut-off）及其测定“灰区”（即指测定吸光度处于cut-off周遭的必定区域，此区域内结果应为“可疑”）的统计筹划功效，不光便利了试验室办事职员，并且正在某些特定的情形下，有很高的适用代价。如血站试验室为筛检献血员血实行HBsAg、抗HCV和抗HIV等的ELISA测依时，常会碰到测定吸光度处于cut-off相近但又低于cut-off的血，依据试剂盒的模范，可判为阴性，血为及格血，可用于患者输血，但直觉告诉咱们，如许的血如输给患者，导致输血表态应疾病爆发的或者性较大，这是由ELISA现有的测定工夫的不确定性所酿成的，也便是ELISA测定的“灰区”的存正在使得ELISA测定试剂盒cut-off的设定只是相对的无误，此时的假阳性和假阴性闪现的或者性较低。以是，正在血站筛检献血员血时，如以测定“灰区”的下限行动剖断献血员血筛检不足格模范，就可能避免因“灰区”所致结果剖断舛讹而惹起输血后疾病爆发的或者性。适宜的软件功效对付ELISA定量测定同样很紧急。有切磋声明，四参数方程能较好地反应免疫测定的剂量反响弧线，最为适合于定量酶免疫测定的弧线拟合。以是，如宗旨是定量测定，则正在酶标仪的软件功效中，最好要有这种弧线回归方程筹划解析功效。其他诸如连点、直线等回归筹划，则可依照酶标仪的操纵宗旨而定，如兼用于微量生化测定，则此类回归筹划就很有须要。

　　别的，酶标仪兼做酶标动力学、固结反响测定所需的软件是否应具备，当然也应依照利用宗旨而定。因为此类软件大凡都较为腾贵，酶标仪常别的寡少按需装备，即使不是试验室奇特必要，就不必强求这种软件功效。

　　平日中高等酶标仪都带有触摸操作屏，无需正在表接电脑利用，这对付某些下层试验室或者会供给很好的帮帮，从而大限造地阐明酶标仪的用意。如上海游目仪器公司的MB-96C酶标仪采用10.4英寸彩色液晶触摸屏，全新Windows彩色图形化界面，全中文操作体系，维持鼠标、键盘，维持多种输入法。如许就大大便利了雄伟下层试验室工夫职员的利用。

　　综上所述，虽然酶标仪的生长极为速捷，品种繁多，功效也无间增强，但其最底子的功用是稳定的，即比色测定。大凡比色测定，其根本恳求便是正在必定吸光度限造内要有好的测定无误性、线性和严谨性。同样的吸光度限造，测定的无误性、线性和严谨性越好则酶标仪亦越佳。

　　并且，因为用于酶标仪比色测定的为多孔（平日为96孔）微孔板条，为担保测定的孔间反复性，则测定速率也是一个较紧急的功能目标。至于其他如震板、温育及相闭的软件功效，则可依照各自试验室的必要去比拟选取。

　　酶标仪是一种严谨的光学仪器，以是精良的办事情况不但能确保其无误性和巩固性，还可能延迟其利用寿命。依照DINVDE0871条例，仪器应安放正在无磁场和搅扰电压的位子。依照DIN45635-19条例：

　　酶标仪的功效是用来读取酶联免疫试剂盒的反响结果，以是要获得无误结果，试剂盒的利用必需典范。很多病院正在利用酶标仪之前是通过目测剖断结果，操作流程肆意性较大，正在利用酶标仪后即使不行实时改进操作民俗，会酿成较大偏差。正在酶标仪的操作中应预防以下事项：